Trabalho de Vera van der Velpen, Evangelia Liakoni, Mats B Hirt, Celina M Vonwyl, Samuel E Christen, Urs Duthaler, Peyton Jacob, Manuel Haschke
Artigo original: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39919465/
Abstrato
Introdução: Quantificar baixas concentrações de nicotina e seus metabólitos em biofluidos é um desafio devido à contaminação ambiental por nicotina. No entanto, a quantificação precisa dessas concentrações é crucial para estudos sobre sistemas eletrônicos de entrega de nicotina (ENDS) que utilizam e-líquidos com diferentes teores de nicotina.
Métodos: Desenvolvemos um método LC-MS/MS para quantificar nicotina, cotinina e 3′-hidroxicotinina (3-OH-cotinina) em soro e saliva para análises farmacocinéticas (PK) e estudos em larga escala.
Resultados: Para garantir uma cromatografia confiável e reduzir o trabalho laboratorial, utilizamos cromatografia C18 com extração em uma única etapa, empregando metanol e ZnSO4 0,1 M (4:1, v/v) no soro e metanol a 80% na saliva. A contaminação ambiental por nicotina foi controlada com a implementação de uma coluna de atraso C18, que separou a nicotina presente nas fases móveis da nicotina das amostras. O tempo total de corrida foi de 6 minutos, e os limites inferiores de quantificação foram de 0,5, 0,25 e 0,5 ng/ml para nicotina, cotinina e 3-OH-cotinina, respectivamente, no soro, e 3, 1 e 2 ng/ml na saliva. As curvas padrão em ambos os biofluidos abrangeram até 1000 ng/ml, com valores de R superiores a 0,995. A precisão intra e entre corridas variou de 97,1% a 106,9%, com uma precisão ≤ 10,8%. A validação cruzada de amostras de soro com outro laboratório mostrou boa concordância, com viés de 0,56, -3,0 e -6,5 ng/ml para nicotina, cotinina e 3-OH-cotinina, respectivamente.
Conclusões: A integração de uma coluna de atraso ao método LC-MS/MS mitigou a interferência da nicotina ambiental e facilitou a quantificação de concentrações muito baixas de nicotina e de dois de seus principais metabólitos na saliva e no soro. A cromatografia C18 e a extração em uma única etapa tornam o método estável e adequado para análise de grandes volumes de amostras.
